摘要:本文采用胡颓子、麦冬、十大功劳、香樟和南天竹五种植物的果实作为实验材料,通过测量抑菌圈的大小来比较其对大肠杆菌的抑菌效果。结果表明:十大功劳的果实具有抑菌作用;麦冬非但没有抑菌作用,还会增加菌落数量。 关键词:植物果实、大肠杆菌、抑菌效果 近年来,不同植物天然成分的提取和抑菌效果的研究越来越多,尤其是植物精油等挥发性物质和食物防腐剂抑菌效果的研究,如米热古丽等人对新疆薰衣草、玫瑰和葡萄籽三种植物精油的抑菌效果进行研究,发现薰衣草和玫瑰精油对细菌具有较强的抑菌效果,可作为天然抑菌剂[1]。如王琼等人探索六种食品防腐剂亚硝酸盐、苯甲酸钠等对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,发现不同添加剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用强弱顺序分别为:茶多酚>壳聚糖>聚赖氨酸>苯甲酸钠>亚硝酸盐[2]。但是很少有文献报道植物果实中有抑菌成分。 大肠埃希氏菌(E. coli)通常被称为大肠杆菌, 对人和动物有病原性,尤其是婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症,它可以通过牛肉膏蛋白胨培养基来培养其菌落,选用大肠杆菌作为菌种来检验和比较不同植物果实的抑菌作用,可以应用到生活中,比如将其成分加到肥皂、洗手液等内制成纯天然抑菌产品。 本课题选取5种植物果实作为实验材料,探讨果实中是否有抑菌成分以及不同果实抑菌效果的大小。 1.材料和方法 1.1实验材料和试剂 琼脂(1克),牛肉膏(1克),蛋白胨(2克),氯化钠(1克),锥形瓶,大烧杯,玻璃棒,酒精灯,pH试纸,记号笔等 1.2实验方法 1.2.1牛肉膏培养基的配制 在烧杯内加200毫升水,放入称量好的牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免黏底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌锅灭菌15~30分钟。 1.2.2制作平板,涂布大肠杆菌 从灭菌锅内取出牛肉膏蛋白胨培养基,在超净工作台上将培养基倒入培养皿内,以铺满整个皿底为宜,等培养液冷却成固体后,倒置放入恒温培养箱内,贴好标签,等24小时后若平板未被染菌,则平板可用。在无菌操作平台内,用滴管滴一滴菌液在平板内,用无菌玻璃刮铲将菌液均匀涂布至整个培养皿。 1.2.3不同植物果实的抑菌实验 选择胡颓子、麦冬、十大功劳、香樟、南天竹等植物的果实进行实验,首先称取相同重量的植物果实放在研钵中,然后不断进行研磨,将滤液过滤于培养皿中,在滤液中加入小圆纸片备用。 取出大肠杆菌培养基,用记号笔在培养皿底部把它平均分成4份,标上A、B、C、D(对照)。A、B、C中分别加入不同植物果实的小圆纸片,D中加入浸在蒸馏水中的小圆纸片。不同小组各选择3种不同的植物果实,共分为8组,可重复进行实验。整个过程在超净工作台进行,最后将培养皿放入恒温培养箱中,隔天进行观察与测量数据。 1.3数据测量与分析 通过测量抑菌圈的直径来比较抑菌效果的大小,数据记录三次,求平均值。 2.结果 图中A为胡颓子,B为麦冬,C为十大功劳,只有十大功劳的小圆纸片周围出现明显的抑菌圈,即十大功劳的果实具有抑菌效果;麦冬周围非但没有抑菌圈出现,反而出现大量菌落,可能原因在于其对大肠杆菌不起抑菌作用,其中的营养成分反而有利于大肠杆菌的生长。 3.讨论 3.1不同植物果实对大肠杆菌的抑菌效果的差异 三种植物果实中,可以明显看出不同植物果实对大肠杆菌的抑菌效果是不同的,十大功劳有抑制作用,胡颓子没有抑制效果,麦冬反而有促进作用。今后的课题研究中可以选取更多种类的植物果实,进而得到更加完善的数据。 3.2不同小组同一种植物果实抑菌圈直径的差异 由图1和图2的对比中可以看出,不同小组的十大功劳的抑菌圈直径也有差异,而且差异并不算小。可能的原因是在实验过程中培养基内有细菌进入,或者是用涂布器涂抹大肠杆菌时不够均匀等,在今后的实验中,要有更加完善的规划,操作中按照要求,减少实验的误差,提高实验数据的准确性。 3.3控制大肠杆菌菌落数量的方法 从之前的结果中可得出:十大功劳具有较好的抑菌作用,我们可以通过适量种植十大功劳来抑制大肠杆菌。例如:在家中种上几盆十大功劳的盆栽;在林园里种植一些十大功劳等,或者提取出十大功劳中的抑菌成分,将其加入到香皂、洗手液等产品中,开发出纯天然的抑菌产品。 参考文献 [1]米热古丽,余雄等.三种植物精油抑菌效果的研究[J].新疆农业科学,2011,06. [2]王琼,唐俊妮等.六种食品防腐剂对金黄色葡萄球菌抑菌效果及肠毒素基因表达的影响[J].食品科学,2016.
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